細(xì)胞名稱:	HEI-OC1細(xì)胞, HEIOC1細(xì)胞, 耳蝸毛細(xì)胞株, 聽神經(jīng)細(xì)胞株, 助聽細(xì)胞株, House Ear Institute-Organ of Corti 1
細(xì)胞又名:	HEIOC1; House Ear Institute-Organ of Corti 1
出品公司	ExPASY
編號(hào)	CVCL_D899
細(xì)胞文獻(xiàn)書寫	To cite this cell line use: HEI-OC1 (RRID:CVCL_D899)
細(xì)胞株來源	豪斯耳科學(xué)院 House Ear Institute
種屬來源:	小鼠
組織來源:	耳蝸螺旋器
疾病特征:	正常
用途	各種藥物對(duì)于聽力細(xì)胞毒性毒理學(xué)檢測。
說明	細(xì)胞生長條件是33度時(shí)，細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)快速增值和去分化現(xiàn)象。生長條件是39度時(shí)，細(xì)胞增殖出現(xiàn)停止48h，同時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞出現(xiàn)分化。
細(xì)胞形態(tài):	上皮細(xì)胞樣
生長特性:	貼壁生長
培養(yǎng)基:	DMEM培養(yǎng)基，90%；FBS，10%。二氧化碳10%，33度培養(yǎng)。
生長條件:	氣相：空氣，90%；二氧化碳，10%; 溫度：33 ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% FBS+10% DMSO，液氮儲(chǔ)存
支原體檢測:	陰性
參考文獻(xiàn)	1. Kalinec G.M., Webster P., Lim D.J., Kalinec F. A cochlear cell line as an in vitro system for drug ototoxicity screening. Audiol. Neurootol. 8:177-189(2003)   2. Park C., Thein P., Kalinec G.M., Kalinec F. HEI-OC1 cells as a model for investigating prestin function. Hear. Res. 335:9-17(2016)   3. Kalinec G.M., Thein P., Park C., Kalinec F. HEI-OC1 cells as a model for investigating drug cytotoxicity. Hear. Res. 335:105-117(2016)

HEI-OC1耳蝸毛細(xì)胞特點(diǎn)和簡介

HEI-OC1是為數(shù)不多的用于研究目的的小鼠聽覺細(xì)胞系之一。這些細(xì)胞*初被認(rèn)為是一種用于篩選耳毒**物的體外系統(tǒng)，已被用于研究藥物激活的凋亡途徑、自噬、衰老、細(xì)胞保護(hù)機(jī)制、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞分化、藥物的遺傳和表觀遺傳效應(yīng)、缺氧、氧化和內(nèi)皮細(xì)胞的作用，耳蝸中分子通道和受體的表達(dá)。在耳蝸毛細(xì)胞的其他幾個(gè)重要標(biāo)志物中，HEI-OC1細(xì)胞在耳蝸毛細(xì)胞內(nèi)表達(dá)Prestin蛋白，這是外毛細(xì)胞的典型運(yùn)動(dòng)蛋白。因此，HEIOC1細(xì)胞對(duì)于闡明這種重要聽覺蛋白的新功能和作用機(jī)理方面非常有用。HEI-OC1細(xì)胞非常健壯，其培養(yǎng)通常不會(huì)出現(xiàn)大的并發(fā)癥。但是，它們需要一些特殊的條件，例如避免使用含有鏈霉素或其他抗生素，以及在33°C下孵育以刺激細(xì)胞增殖，在39°C下孵育以觸發(fā)細(xì)胞分化。

HEI-OC1耳蝸毛細(xì)胞接受后處理

1) 收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液 ，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。

 2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

 4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

 5) 接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
 

HEI-OC1細(xì)胞聽神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)操作

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入 約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。

 2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
   
     1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯 微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
   
     3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培 養(yǎng)液后吹勻。

     4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

    1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止 消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度 為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

HEI-OC1耳蝸毛細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

 1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
 
 2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一 致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

 3.   用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng) 箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力 正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們 為您再免費(fèi)寄送一次。

 4.   靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正 常傳代。

 5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培 養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

 6.   建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?因，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

 7.該細(xì)胞僅供科研使用。